Imunoensaio qualitativo para determinação de resíduos de antibióticos tetraciclina em amostras de leite seguido de HPLC quantitativo melhorado

Scientific Reports volume 12, Artigo número: 14502 (2022) Citar este artigo

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Os contaminantes ambientais são um dos vários problemas que prejudicam as pessoas e a vida selvagem. Um exemplo de contaminantes emergentes atuais são os resíduos de antibióticos que podem estar presentes na água e nos alimentos. Embora os antibióticos se destinem a tratar ou prevenir infecções humanas e animais, os antibióticos também têm sido utilizados como suplementos alimentares para animais pela sua capacidade de promover o crescimento e a eficiência alimentar. Este uso excessivo de antibacterianos resultou no acúmulo de resíduos de antibióticos em produtos alimentícios que eventualmente são consumidos por humanos. A exposição contínua e desnecessária de humanos a antibióticos através da alimentação direta de animais ou do leite, ou indiretamente através de plantas ou solo pode aumentar a chance de surgimento de bactérias multirresistentes a medicamentos e, consequentemente, afetar negativamente a saúde humana. Novas regulamentações foram impostas em relação à utilização de antibióticos. Devido à escassez de dados sobre as condições de resíduos de antibióticos em diferentes tipos de alimentos destinados ao consumo humano na Arábia Saudita, este estudo propôs um método cromatográfico otimizado (HPLC-DAD) seguido de uma abordagem de imunoensaio para detectar especificamente antibióticos tetraciclinas em amostras de leite animal. O método foi realizado utilizando coluna RP-C18 com fase móvel composta por KH2PO4 0,01 M:acetonitrila:metanol (70:20:10, v/v/v) ajustado para pH 4. Foram observadas melhorias no método em termos de resolução e sensibilidade. O método de precipitação de proteínas utilizado para extração demonstrou altas percentagens de recuperação de 85–101%. O método foi validado de acordo com as diretrizes da Conferência Internacional para Harmonização (ICH). É evidentemente claro a partir destas conclusões que a presença de resíduos de antibióticos tetraciclina e oxitetraciclina em produtos lácteos provenientes do mercado saudita está abaixo dos limites residuais máximos (LMR).

A poluição ambiental é um desafio que o mundo enfrenta no século atual. Esta questão é definida como “a contaminação dos componentes físicos e biológicos do sistema terra/atmosfera a tal ponto que os processos ambientais normais são afetados negativamente”1. Substâncias ou energia que se apresentam acima dos níveis naturais são consideradas poluentes1. Resíduos de antibióticos são uma forma de contaminante ambiental que pode se apresentar em animais, plantas ou solo e pode promover o desenvolvimento de resistência microbiana. A resistência microbiana que ocorre a partir do uso desnecessário e da exposição a antibióticos é definida como alterações nos mecanismos de resistência bacteriana ou o desenvolvimento de novos mecanismos em resposta a antibióticos específicos, uma classe de antibióticos ou vários tipos de antibióticos para os chamados patógenos multirresistentes ( MDR)2. Na tentativa de preservar a atividade antimicrobiana, as autoridades reguladoras restringiram o processo de prescrição de antibióticos. No entanto, os antibióticos também são utilizados como conservantes de alimentos, para promover o crescimento e aumentar a produtividade do gado e das aves, além da sua utilização na medicina veterinária3,4,5. Pesquisas anteriores demonstraram que o uso de altos níveis de antibióticos para aumentar a produtividade animal está associado à presença de resíduos de antibióticos em alimentos de origem animal6,7,8. A exposição contínua de humanos a resíduos de antibióticos pode ser prejudicial aos humanos, aumentando a possibilidade de desenvolver reações alérgicas, perturbar a flora intestinal normal ou pode transferir bactérias resistentes a antibióticos (ARB) ou genes de resistência a antibióticos (ARGs) de animais para humanos5.

Tetraciclina (TTR), clortetraciclina (CTC) e oxitetraciclina (OXY), estão entre os antibióticos mais utilizados na pecuária devido à sua eficácia e baixo custo9,10. Muitos estudos têm demonstrado a utilização inadequada desses antibióticos em todo o mundo e as consequências de tal prática6,11. Por exemplo, há uso descontrolado de antibióticos na alimentação mista de animais ou como conservantes na indústria alimentícia12,13. Além disso, os antibióticos são frequentemente administrados aos animais imediatamente antes do abate ou introduzidos na artéria carótida imediatamente após o abate para aumentar o período de armazenamento da carne fresca12. Eventualmente, as concentrações residuais de antibióticos podem exceder os limites residuais máximos (LMR) permitidos pela União Europeia (UE) e pela Organização Mundial da Saúde (OMS).